Thermal Injury Protocol to Study Healing, With and Without Infection, in Guinea Pig (Cavia porcellus) Model / Protocolo de Lesión Térmica, para Estudio de Cicatrización, en Modelo Animal Cobayo (Cavia porcellus)

SUMMARY: Experimental healing studies in humans are complex and difficult to replicate in vitro. Hence, animal models are needed to study the different stages involved. The guinea pig (Cavia porcellus) is a model close to human physiology, including the lack of vitamin C synthesis, a precursor of collagen fibers for healing. The thermal injury in this animal makes it possible to study all the stages of healing, taking few days to show tissue repair in the processes with and without localized infection. The aim of this work was to systematize an experimental guinea pig (Cavia porcellus) animal model protocol for studies on healing with and without localized infection.

Los estudios experimentales de cicatrización en humanos son complejos, difícilmente replicables in vitro, por lo que se hace necesarias modelos animales que permitan el estudio de las distintas etapas que ella implica. El cobayo (Cavia porcellus) resulta ser un modelo cercano a la fisiología humana, incluyendo la falta síntesis de vitamina C precursora de fibras colágenas para la cicatrización. La lesión térmica en este animal, permite estudiar todas las etapas de la cicatrización, mostrando pocos días en la reparación tisular, tanto en proceso con y sin infección localizada. El objetivo de este trabajo fue sistematizar un protocolo de modelo animal experimental en cobayo (Cavia porcellus) para estudios de cicatrización con y sin infección localizada.

Ulmoplus® increases FGF-2 expression and promote burn wound healing / Ulmoplus® incrementa la expresión de FGF-2 y promueve la cicatrización de heridas por quemadura

SUMMARY: The role of fibroblast growth factor (FGF) in the wound repair process has been described, particularly during the stimulation of angiogenesis in the proliferative phase. Ulmo honey (Eucryphia cordifolia) has demonstrated important bactericidal, fungicidal, antioxidant and healing properties. Ulmoplus®, a honey-based medicinal product, accelerates healing time and promotes fibroblast activation and collagen fiber production. The aim of this study was to evaluate the immunohistochemical expression of endogenous FGF-2 in burns treated with Ulmoplus® vs. the gold standard (hydrogel-tull), and Ulmo honey as the first step to clarifying the regulatory mechanism of this therapeutic option. 15 adult guinea pigs (Cavia porcellus) were used, divided into three groups: C+: positive control treated with hydrogel-tull (gold standard); E1: experimental group treated with Ulmo; and E2: experimental group treated with Ulmoplus®. A deep uniform burn was made under anesthetic that covered 1 cm2 of the skin on the back of each animal. The daily treatments were administered with hydrogel-tull, Ulmo honey or Ulmoplus®, where appropriate. On treatment day 10 the biopsies were taken and processed for histological and immunohistochemical analysis. The immunolabeling was quantified through an integrated optical density (IOD) analysis, expressed as lum/ µm2 using the Image- ProPremier 9.1 software. The endogenous expression of FGF-2 was consistent with the stage of healing presented by the study groups, varying in its localization and IOD intensity. The E2 group presented a significantly higher IOD (60053.55 ± 59877.84 lum/µm2) than the C+ (p = 0.001) and E1 (p = 0.001) groups. Our findings indicated that the medicinal Ulmoplus® honey is effective at facilitating wound closing, and the promoter effect of FGF-2 expression accelerated the healing process compared to the treatments with hydrogel-tull (gold standard) and Ulmo honey.

RESUMEN: Se ha descrito el papel del factor de crecimiento fibroblaástico (FGF) en el proceso de reparación de heridas, particularmente durante la estimulación de la angiogénesis en la fase proliferativa. La miel de Ulmo (Eucryphia cordifolia) ha demostrado importantes propiedades bactericidas, fungicidas, antioxidantes y cicatrizantes. Ulmoplus®, un medicamento a base de miel, acelera el tiempo de cicatrización y promueve la activación de fibroblastos y la producción de fibras colágenas. El objetivo de este estudio fue evaluar la expresión inmunohistoquímica del FGF-2 endógeno en quemaduras tratadas con Ulmoplus® frente al gold standard (hidrogel-tull) y miel de Ulmo como primer paso para esclarecer el mecanismo regulador de esta opción terapéutica. Se utilizaron 15 cobayas adultos (Cavia porcellus), divididos en tres grupos: C +: control positivo tratado con hidrogel-tull (gold standard); E1: grupo experimental tratado con Ulmo; y E2: grupo experimental tratado con Ulmoplus®. Se realizó una quemadura profunda uniforme bajo anestesia que cubrió 1 cm2 de la piel del lomo de cada animal. Los tratamientos diarios se administraron con hidrogel-tull, miel de Ulmo o Ulmoplus®, en cada caso. El día 10 de tratamiento se tomaron biopsias y se procesaron para análisis histológico e inmunohistoquímico. El inmunomarcaje se cuantificó mediante análisis de densidad óptica integrado (DOI), expresado como lum/µm2 utilizando el software Image-ProPremier 9.1. La expresión endógena de FGF-2 fue consistente con la etapa de cicatrización presentada por los grupos de estudio, variando en su localización e intensidad de DOI. El grupo E2 presentó una DOI significativamente mayor (60053,55 ± 59877,84 lum/µm2) que los grupos C + (p = 0,001) y E1 (p = 0,001). Nuestros hallazgos indicaron que la miel de uso médico Ulmoplus® es eficaz para facilitar el cierre de heridas, y el efecto promotor de la expresión de FGF-2 aceleró el proceso de curación en comparación con los tratamientos con hidrogel-tull (gold standard) y miel de Ulmo.

Reparación de lesiones musculares por incisión quirúrgica coadyuvada con una formulación basada en miel nativa (Ulmoplus®): estudio experimental en modelo animal de conejo (Pryctolagus cuniculus) / Repair of muscle injuries by coadjugated surgical incision with a native honey formulation (Ulmoplus®): experimental study on rabbit animal model (Oryctolagus cuniculus)

Para promover la reparación y regeneración muscular, se han desarrollado diferentes estrategias, sin embargo, aún no existe un tratamiento único aceptado. Investigaciones relacionan los efectos terapéuticos de la miel en el proceso de cicatrización de heridas de diversas etiologías. Considerando lo anterior, el propósito de este estudio fue evaluar los efectos de una formulación basada en miel nativa (Ulmoplus®) en la reparación de lesiones musculares por incisión quirúrgica. A cinco conejos (Oryctolagus cuniculus) se les realizó una incisión de 20 mm de largo y 3 mm de ancho en la región anterior de cada pierna, atravesando la epidermis, dermis y el músculo tibial anterior, hasta alcanzar el periostio de la tibia. La pierna izquierda de cada animal fue clasificada como grupo sutura (S) y la derecha como grupo sutura más Ulmoplus® (S+U). Posteriormente, al grupo S+U se le aplicó Ulmoplus® en toda la extensión de la herida. Luego, en ambos grupos, la incisión fue suturada con cuatro puntos intradérmicos (vicryl 2/0). Un animal fue considerado como control para obtener imágenes histológicas del músculo tibial anterior sin injuria. A los 10 días post incisión, fueron tomadas las biopsias del músculo y posteriormente fueron procesadas para su observación en microscopio de luz. El estudio se llevó a cabo considerando las recomendaciones de la Guía para el Cuidado y Uso de Animales de Laboratorio. A los 10 días post incisión, las injurias, en ambos grupos de animales, se encontraban cerradas y sin signos de infección. El músculo tibial anterior de los especímenes del grupo S se encontraba en la fase de reparación, con procesos concomitantes de fagocitosis del tejido necrotizado, regeneración de miofibras y formación de tejido conectivo cicatrizal. El músculo tibial anterior de los animales del grupo S+U se encontraba en la fase de remodelación, ya que la arquitectura muscular se evidenciaba restablecida. Ulmoplus®, como coadyuvante en el proceso de cierre de heridas quirúrgicas de músculo esquelético utilizando sutura convencional, es una buena alternativa, ya que acelera el proceso de reparación muscular, y reduce el tejido conectivo cicatrizal.

To promote muscle repair and regeneration, different strategies have been developed, however, there is still no single accepted treatment. Research relates the therapeutic effects of honey in the wound healing process of various etiologies. The aim of this study was to evaluate the effects of native honey formulation (Ulmoplus®) in the repair of muscle injuries by surgical incision. In five rabbits (Oryctolagus cuniculus) were made an incision 20 mm long and 3 mm wide in the anterior region of each leg, crossing the epidermis, dermis and anterior tibial muscle, until reaching the tibia periosteum. The left leg of each animal was classified as a suture group (S) and the right leg as a suture group plus Ulmoplus® (S + U). Subsequently, Ulmoplus® was applied to the entire S + U group throughout the entire length of the wound. Then, in both groups, the incision was sutured with four intradermal points (vicryl 2/0). An animal was considered as a control to obtain histological images of the anterior tibial muscle without injury. At 10 days post incision, muscle biopsies were taken and subsequently processed for observation under light microscopy. The study was carried out considering the recommendations of the Guide for the Care and Use of Laboratory Animals. At 10 days post incision, the injuries, in both groups of animals, were closed and without signs of infection. The anterior tibial muscle of the S group specimens was in the repair phase, with concomitant processes of phagocytosis of the necrotized tissue, myofiber regeneration and formation of scar connective tissue. The anterior tibial muscle of the animals of the S + U group was in the remodeling phase, since the muscular architecture was evidenced restored. Ulmoplus®, as an adjunct in the process of closing surgical wounds of skeletal muscle using conventional suture, is a good alternative, since it accelerates the muscle repair process and reduces scar connective tissue.

Comparación entre suturas convencional coadyuvada con ulmoplus® y sin ulmoplus® en el cierre de incisiones de piel de conejo ( Oryctolagus cuniculus ) / Comparison between conventional sutures with ulmoplus® and without ulmoplus® in the incision closure of rabbit skin ( Oryctolagus cuniculus )

Considerando los avances en las investigaciones que relacionan los efectos terapéuticos de la miel en el proceso de cicatrización de heridas, la presente investigación tuvo como objetivo evaluar y comparar cualitativamente, a través de una análisis morfológico, la respuesta tisular local entre sutura convencional coadyuvada con Ulmoplus® y sin Ulmoplus® en el cierre de la incisión de piel de conejo. Se utilizaron 10 conejos adultos, divididos en grupo S (sutura) y grupo S+U (sutura más Ulmoplus®). Se les realizó una incisión de 10 mm de largo, en la región anterior de la pierna, a través de la epidermis y dermis, hasta llegar a la fascia profunda que cubría al músculo tibial anterior. Posteriormente, solo al grupo S+U se le aplicó Ulmoplus®. Luego, en ambos grupos, la incisión fue suturada con dos puntos intradérmicos de ácido poliglicólico (vicryl 2/0). Después de 10 días post incisión fueron tomadas las biopsias de la piel y procesadas para su observación en microscopio de luz. El estudio se llevó a cabo considerando las recomendaciones de la Guía para el Cuidado y Uso de Animales de Laboratorio. Ambos grupos presentaron una incisión cerrada al día 10, con características microscópicas propias de una fase proliferativa. No obstante, el grupo S+U mostró una cicatriz de menor longitud y de aspecto más plano, cuya epidermis estaba mejor organizada y era de menor grosor, con células basales diferenciadas. A nivel dérmico se observó contracción de la herida, evidenciándose una zona cicatrizal de menor tamaño. Ulmoplus®, es una buena alternativa como coadyuvante en el proceso de cierre de heridas quirúrgicas utilizando sutura convencional, ya que acelera el proceso de cicatrización y permite mejores resultados estéticos de la cicatriz.

Considering the advances in research that relate honey therapeutic effects in wound healing process, the present investigation aimed to evaluate and compare qualitatively, through morphological analysis, the local tissue response between conventional suture with Ulmoplus ® and without Ulmoplus ® in the closure of the rabbit skin incision. We used 10 adult rabbits, divided into group S (suture) and group S + U (suture plus Ulmoplus®). An 10 mm long incision was made in the anterior region of the leg, passing through epidermis and dermis, until reaching the deep fascia that covered the anterior tibial muscle. Subsequently, only the S + U group was given Ulmoplus®. Then, in both groups, the incision was sutured with two intradermal points of polyglycolic acid (vicryl 2/0). After 10 days post incision, biopsies of the skin were taken and processed for observation in a light microscope. The study was carried out considering the recommendations of the Guide for the Care and Use of Laboratory Animals. Both groups had a closed incision at day 10 with microscopic characteristics of a proliferative phase. However, the S + U group showed a scar of shorter length and flatter appearance, whose epidermis was more organized and thinner, with differentiated basal cells. At the dermal level, wound contraction was observed, evidencing a smaller scar area. Ulmoplus®, as a coadjuvant in closing surgical wounds process using conventional suture is a good alternative, since it accelerates the healing process and allows better aesthetic results of the scar.

El rol de la miel en los procesos morfofisiológicos de reparación de heridas / Rol of the miel in the morphophysiologic process of the reparation wounds

Los beneficios de la miel de abeja (Apis mellifera) se conocen desde hace miles de años y ha sido utilizada en la antigüedad por su valor nutritivo y medicinal siendo "redescubierta" por la medicina moderna debido a sus importantes propiedades anti-bacterianas en heridas infectadas. Nuevos estudios han argumentado a favor de la capacidad de la miel para interactuar con la compleja maquinaria celular y llevar a cabo la reparación de los tejidos. Por este motivo, se realizó una revisión de los contenidos actuales de las propiedades de la miel y su rol en los procesos morfofisiológicos de reparación de heridas. De esta manera se abarcó la acción anti-bacteriana, anti-oxidante y anti-inflamatoria de sus componentes. Así mismo, se revisaron las propiedades físicas y de desbridamiento, la importancia del origen floral y ubicación geográfica en el valor medicinal de los diferentes tipos de miel. Los estudios sugieren que los efectos de la miel son el resultado de una actividad combinada, donde sus componentes interactúan de manera sinérgica para lograr su función terapéutica. Su acción la realiza en todas las etapas del proceso morfofisiológico de reparación logrando acelerar la cicatrización de heridas. El origen florar y ubicación geográfica de la miel son factores importantes a considerar, ya que ésta varía en su composición y, por lo tanto, también su valor medicinal.

The benefits of honey bee honey (Apis mellifera) have been known for thousands of years and it has been used since ancient times for its nutritional and medicinal values. It was "rediscovered" by modern medicine as a result of its important anti-bacterial properties in infected wounds. New studies have argued for the ability of honey to interact with the complex cellular machinery and achieve tissue repair. Therefore, a review was carried out of current contents of the properties of honey and their role in the morphophysiological processes of wound repair. Hence, antibacterial action, anti-oxidant and anti-inflammatory components of its properties were evaluated. At the same time, we reviewed physical and wound debridement benefits, the importance of floral origin and geographical location in the medicinal value of different types of honey. The studies suggest that the effects of honey are the result of a combined activity, where its components interact synergistically to achieve therapeutic function. Its action is realized in all stages of the morphophysiological repair process, accomplishing accelerated wound healing. The floral origin and geographical location of the honey are important factors to consider since the composition of honey is variable, as is its medicinal value.

Efecto cicatrizante de la miel de ulmo (Eucryphia cordifolia) suplementada con ácido ascórbico como tratamiento en quemaduras / Healing effect of ulmo honey (Eucryphia cordifolia) supplemented with ascorbic acid as treatment in burns

Debido al daño de la piel producto de quemaduras, los microorganismos encuentran condiciones favorables para su desarrollo, produciéndose desnaturalización, necrosis, exudado, congestión y edema. La miel posee actividad antioxidante, antiinflamatoria y antibacteriana. A su vez, el ácido ascórbico mejora la barrera epidérmica y reduce la contracción de heridas, entre otros. El objetivo de esta investigación fue evaluar morfológicamente la cicatrización de heridas con un tratamiento en base a miel de ulmo (Eucryphia cordifolia) suplementada con ácido ascórbico, comparando su efecto con miel de ulmo no suplementada, en heridas causadas por quemaduras de tipo B. La investigación fue aprobada por el Comité Ético Científico de la Universidad de La Frontera. Se trabajó con 15 cobayos (Cavia porcellus) distribuidos en tres grupos: MS (miel suplementada), M (miel), y Control+ (Hidrogel-Tull). Se provocó una quemadura en seco en el dorso del tórax de 1 cm de diámetro, que abarcó hasta el límite de la fascia profunda. Al día 10 de tratamiento, se extrajeron las biopsias y se depositaron en PBS. Posteriormente, fueron fijadas en formalina tamponada y procesadas para fines histológicos, realizándose las técnicas de VGE, VGC, PAS, y Sirius Red. El cobayo se utilizó como modelo animal por tener un metabolismo dependiente de ácido ascórbico. El grupo MS mostró un rápido debridamiento en comparación a los grupos control, con cierre epidermal en el 60% de las muestras, observándose una fase proliferativa avanzada. El grupo M no regeneró la capa epidérmica y presentó una fase proliferativa inicial. Los resultados de este estudio evidenciaron que al suplementar la miel de ulmo con ácido ascórbico se logra una cicatrización más rápida, con respecto a la miel de ulmo no suplementada, en heridas causadas por quemaduras.

Skin damage from burns creates favorable conditions for microorganism development, producing denaturation, necrosis, discharge, congestion and edema. Honey contains antioxidant, anti-inflammatory and antibacterial properties. At the same time ascorbic acid reduces the epidermal barrier and wound contraction, among others. The objective of this research was to morphologically evaluate wound healing with treatment based on Ulmo honey (E. cordifolia) supplemented with ascorbic acid, comparing its effect with unsupplemented Ulmo honey, in wounds caused by type B burns. The research was approved by the Scientific Ethics Committee of the Universidad de La Frontera. We worked with 15 guinea pigs (Cavia porcellus) divided into three groups: SH (supplemented honey), H (honey), and Control + (Hydrogel-Tulle). A 1 cm diameter dry burn was caused on the back of the chest and covered the extent of the deep fascia. At day 10 of treatment, biopsies were removed and placed in PBS. They were subsequently fixed in buffered formalin and processed for histological purposes, with VGE, VGC, PAS, and Sirius Red techniques. The guinea pig was used as an animal model for having a metabolism dependent on ascorbic acid. The SH group showed a rapid debridement compared to control groups, with epidermal closure in 60% of the samples, and advanced proliferative phase was observed. The H group did not regenerate epidermal layer and showed an initial proliferative phase. The results of this study showed that supplementing Ulmo honey with ascorbic acid achieves faster healing when compared to unsupplemented Ulmo honey in wounds caused by burns.

Estudio comparativo de la cicatrización en quemaduras con tratamiento en base a miel de ulmo (eucryphia cordifolia) y vitamina C oral versus hidrogel en cobayos (cavia porcellus) / Comparative study of healing in burns treatment based on ulmo honey (eucryphia cordifolia) and oral vitamin C in guinea pig (cavia porcellus) versus hydrogel

La quemadura es una herida traumática que resulta en un daño local y sistémico, con cambios oxidativos. La miel posee actividad antioxidante, antiinflamatoria y antibacteriana. A su vez, la vitamina C mejora la barrera epidérmica y reduce la contracción de heridas, entre otros. El objetivo de este estudio fue evaluar morfológicamente el efecto del tratamiento con miel de ulmo + vitamina C en cobayo y comparar su capacidad cicatrizante y debridante con hydrogel+tull en heridas causadas por quemaduras tipo B al día 10 post-injuria. Se utilizaron 15 cobayos (Cavia porcellus) distribuidos en los grupos A (miel de ulmo tópica y vitamina C oral), B (hidrogel-tull), y Control (suero fisiológico al 0,9 por ciento). Se observó el debridamiento de las heridas, y se realizaron curaciones diarias hasta la obtención de biopsias al día 10 post-injuria. Secciones de 4 um fueron teñidas con HE, Tricrómico de Masson y PAS. En el grupo A se produjo un rápido debridamiento respecto al grupo B y Control. El tratamiento en estudio presentó una fase proliferativa avanzada al día 10 post-injuria, con tejido vascularizado, presencia de fibras colágenas y fibroblastos. La epidermis se regeneró por completo, presentando una lámina basal visible mediante la tinción PAS. El grupo B presentó una etapa fibroblástica proliferativa inicial, observándose elementos agudos a nivel dérmico. La fase de epitelización se completó solo en el 50 por ciento de las muestras. La miel ulmo + vitamina C mostraron ser sustanciasefectivas como material de tratamiento en la cicatrización de quemaduras tipo B de piel en cobayo.

A burn is a traumatic injury resulting in local and systemic injury with oxidative changes. Honey has antioxidant, anti-inflammatory and antibacterial properties. At the same time, among other benefits vitamin C improves the epidermal barrier and reduces wound contraction. The aim of this study was to evaluate morphologically the effect of regimen with Ulmo honey + vitamin C in guinea pigs and compare its healing and debriding potential with Hydrogel + tull in injuries caused by type B burns at day 10 post-injury. We used 15 guinea pigs (Cavia porcellus) distributed in groups A (Ulmo honey and vitamin C topical, oral), B (hydrogel-tull), and control (0.9 percent saline). Wound debridement was observed daily and wound treatment was performed daily until biopsies were obtained at day 10 post-injury. Four 4 um sections were stained with HE, Masson's trichrome and PAS. In group A there was rapid debridement when compared with groups B and Control. Treatment study presented advanced proliferative phase at day 10 post-injury with vascularized tissue, and presence of collagen fibers and fibroblasts. The epidermis was completely regenerated, presenting a visible basal lamina by PAS staining. Group B presented an initial proliferative fibroblastic phase, showing acute dermal elements. Epithelialization phase was completed in only 50 percent of the samples. Ulmo honey + vitamin C substances have been shown to be effective as treatment material in healing of type B burns in guinea pig skin.

Comparación de dos softwares en histología humana, como utilización complementaria a la enseñanza tradicional / Comparison of two human histology software as complementary use in traditional education

Actualmente, la formación de profesionales en la Educación Superior desafía a los docentes a incorporar en sus prácticas de enseñanza no solamente el dominio de contenido disciplinario puro, además, les exige competencias asociadas a la apropiación de conocimientos didácticos para guiar el saber disciplinario. El siguiente estudio pretende aportar con nuevas metodologías de aprendizaje en forma de softwares didácticos para los estudiantes que cursan la asignatura de Histología, de la carrera de Enfermería, Facultad de Ciencias de Salud de la Universidad Autónoma de Chile. Estos módulos interactivos se crearon como apoyo a las clases tradicionales de pasos prácticos con observación al microscopio. Para desarrollar el primer módulo, un total de 200 imágenes fueron digitalizadas a formato JPG. A partir de estas imágenes se realizaron presentaciones con animación personalizada, la que fue llevada al programa Adobe Flash Player creando así al primer software titulado "Módulo Histológico". Al módulo inicial incorporamos información funcional de las preparaciones histológicas, además de mapas conceptuales. Esta innovación resultó especialmente atractiva y decidimos modificar el primer software, creando el segundo programa titulado "Modulo Histofuncional". Para comparar la percepción de los estudiantes sobre ambos módulos se realizó una encuesta de opinión voluntaria y anónima, previamente validada, que contenía preguntas sobre factores relacionados con: contenido, motivación, utilidad, calidad y cantidad. Las respuestas fueron evaluadas a través de una escala de Likert. Los resultados reflejaron objetivamente la recepción favorable que ha tenido el Modulo Histofuncional por parte de nuestros estudiantes. Esto, probablemente, debido a que este software logra integrar el conocimiento de las estructuras con su función, entregando significancia, facilitando el aprendizaje y motivando a los alumnos en el estudio de la Histología.

At present, the training of professionals in Higher Education challenges docents to incorporate in their teaching practice, not only expertise of pure disciplinary content, it also calls for associated aptitudes of didactic knowledge to guide the disciplinary knowledge. This study intends to contribute new teaching methodologies in the form of didactic software for Histology students in the Nursing Degree program, Faculty of Health Sciences of the Universidad Autónoma De Chile. These interactive modules were created as support for traditional classes and practical steps with microscopic observation. For the development of the first module, a total of 200 images were digitalized in JPG format. From those images presentations with personal animation were realized, which were then converted to Adobe Flash Player thus creating the first software entitled "Histological Module". We incorporated functional information to the initial module of histological preparation in addition to concept maps. This innovation was particularly attractive and we decided to modify the initial software, thereby creating the second program entitled "Histo-functional Module". To compare student perception on both modules a previously validated, voluntary and anonymous opinion survey was carried out that included questions on factors related to: content, motivation, utility, quality and quantity. Responses were evaluated by Likert scale. Results objectively reflected the favorable acceptance that the histo-functional Module has had on the part of our students. This is probably the result of this software integrating knowledge of structures and their function, affording it meaning and facilitating learning as well as motivating students in the study of histology.

Cicatrización en quemaduras tipo AB-B en conejillo de indias (Cavia porcellus) utilizando miel de ulmo asociada a vitamina C oral / Healing of burns type AB-B in guinea pig (Cavia Porcellus) using ulmo honey associated with oral vitamin C

En los últimos años se ha incrementado el interés por el uso de terapias alternativas para la curación de heridas. La miel de abeja es una antigua medicina natural que ha sido utilizada en el tratamiento de heridas y úlceras, mientras la vitamina C mejora la barrera epidérmica y reduce la contracción de heridas. Este estudio pretende avalar el tratamiento con miel asociada a vitamina C oral como curación alternativa y eficiente en quemaduras tipo AB-B. Se utilizaron 12 cuyes (Cavia porcellus). Los animales se distribuyeron en grupos A (sin Vitamina C) y B (con Vitamina C). Bajo efectos anestésicos se provocó una quemadura de 1.7 mm de diámetro en la región dorsal derecha, que fue tratada con curaciones con miel. Al mismo tiempo, se provocó una quemadura de similares características en la región dorsal izquierda, tratada con suero Ringer, siendo utilizada como control. De ambas lesiones se obtuvieron biopsias a los 6, 10 y 14 días post injuria. Nuestros resultados muestran que la formación de tejido granular, activación de fibroblastos, y reepitelización es más rápida en el grupo B, donde se observó un tejido vascularizado y fibras colágenas organizadas en el día 14 post injuria, similar al control (biopsia de animal sano). Estos datos confirman que la utilización de la miel de ulmo asociada a Vitamina C oral mejora la regenaración de este tipo de heridas, logrando una cicatrización efectiva, rápida y de buena calidad.

In recent years there has been increasing interest in the use of alternative therapies for healing wounds. Bee honey is an ancient natural medicine that has been used in the treatment of wounds and ulcers, while Vitamin C improves the epidermal barrier and reduces wound contraction. The aim of this study is to support treatment with honey associated with oral vitamin C as an alternative and efficient healing treatment, in type AB-B burns. For this study, twelve guinea pigs (Cavia porcellus) were used. The animals were distributed in groups A (without Vitamin C) and B (with Vitamin C). While under anesthetic effect burn of 1.7 mm in diameter was caused in the right dorsal region, subsequent healing was treated with honey. At the same time a burn of similar characteristics was caused in the left dorsal region, treated with Ringer serum being used as control. Biopsies were obtained from both lesions at days 6, 10 and 14 post injury. Results showed granular tissue formation, fibroblast activation, and reepitalization is more rapid in group B, where vascularized tissue and organized collagen fibers were observed at day 14 post injury similar to control (biopsy in healthy animal). These results confirm that the use of Ulmo honey associated with oral Vitamin C improves regeneration in this type of wound, achieving effective, rapid and good quality healing.

Cambios morfológicos en la regeneración del tendón calcáneo de rata (Sprague Dawley) por la aplicación de ultrasonido continuo / Morphologic changes of the regeneration in the rat's (Sprague Dawley) calnaeous tendon by continous ultrasound applications

Las lesiones de los tendones plantean siempre grandes problemas clínicos y terapéuticos, por su importancia funcional y su peculiar cicatrización. El apoyo fisiátrico, específicamente el tratamiento con ultrasonido, ha demostrado ser eficiente en la regeneración del tendón calcáneo. Este trabajo tuvo como objetivo analizar morfológicamente los efectos del uso de ultrasonido continuo en la regeneración post quirúrgica del tendón calcáneo de rata. Se utilizaron 15 ratas albinas, Sprager Dawle. Luego de 48 horas post tenorrafia se comenzó con una sesión diaria de ultrasonido terapéutico con una intensidad de 1W/cm², frecuencia de 3 MHZ, cabezal de 0,5 cm de ERA, por 30 segundos durante 10 días. Las ratas fueron sacrificadas 48 horas después de terminar las aplicaciones de ultrasonido para la extracción y disección del tendón calcáneo del miembro posterior derecho, mientras que el tendón del miembro posterior izquierdo sirvió de control normal. Para fines de comparación morfológica se trabajó con un grupo de ratas control del tratamiento, en el que se provocó la lesión sin aplicar ultrasonido. Las muestras fueron fijadas en formalina tamponada y teñidas con H.E. Los tendones del grupo experimental se encontraron en un estado de regeneración avanzada, cuyos fibroblastos presentaron características morfológicas propias de una célula activa en la síntesis y secreción de matriz extracelular, con un promedio de fibroblastos similar al obtenido en el tendón normal. A su vez, el tendón del grupo sin tratamiento presentó un estado de regeneración tardío. Las fibras colágenas estaban invadidas por tejido conjuntivo y vasos sanguíneos, con un promedio de fibroblastos que triplica al promedio encontrado en el control normal, lo que determinó que el tendón sin aplicación de ultrasonido se encontrara aún en proceso inflamatorio. Este estudio confirma que el uso de ultrasonido continuo genera una rápida proliferación celular en el tendón lesionado de rata, y en consecuencia, a...

Tendon injuries always account for major clinical and therapeutic problems, due to their functional significance and unique healing. Physiatrics support, specifically ultrasound treatment, has been shown to be effective in the regeneration of the calcaneal tendon.The objective of this study was to morphologically analyze the effect of the use of continuous ultrasound in the post surgery regeneration of the calcaneal tendon of the rat. Ten albino, Sprager Dawley rats were used. Following 48 hours of post tenorrhaphy, a daily session of therapeutic ultrasound was initiated, with an intensity of 1W/cm², frequency of 3 MHZ, header at 0.5 cm ERA, per 30 seconds for 10 days. The rats were sacrificed 48 hours after completion of the ultrasound treatments, for the extraction and dissection of the calcaneal tendon of the right posterior member, while the left posterior member was used for normal control. For purposes of morphological comparison a group of control rats for the treatment was used, in which the injury was caused without applying the ultrasound. Samples were fixed in buffered formalin and stained with H.E. The tendons of the experimental group were found to be in an advanced stage of regeneration which fibroblasts presented morphological characteristics of an active cell in the synthesis and secretion of the extracellular matrix, with an average of fibroblasts similar to that obtained in the normal tendon. At the same time, the tendon of the control group in the treatment, presented a later regeneration stage. The collagen fibers were infiltrated by conjunctive tissue and blood vessels, with an average of fibroblasts that tripled the average found in the normal control, which determined that the tendon without the ultrasound treatment was still in an inflammatory process. This study confirms that the use of continuous ultrasound generated a rapid cellular proliferation in the injured tendon of the rat, and consequently accelerates its regeneration.

Evaluación morfométrica de la relación embrio-uterina de las etapas pre y post implantacional en conejo (Oryctolagus cuniculus) / Morphometric evaluation of the embryo-uterine relationship of the pre and post implantational stages in rabbit (Oryctolagus cuniculus)

El conejo ha demostrado ser un excelente modelo de estudio de implantación. Como ovulador obligado, el tiempo de preñez se puede establecer en forma precisa. La observación morfológica de cortes de úteros de 7, 8, 9 y 10 días pos coito, permitió en este estudio reconstruir una secuencia de los eventos morfométricos que ocurren durante la implantación, en el conejo. Se utilizaron 20 conejas neozelandesas blancas adultas (Oryctolagus cuniculus), nulíparas, no gestantes. Para la cruza, se utilizaron 5 machos de probada fertilidad. Los conejos fueron obtenidos del Bioterio de la Facultad de Medicina de la Universidad de La Frontera, Temuco, Chile. Determinamos como día 0, el momento del coito, sacrificando las hembras los días 7, 8, 9 y 10 de cada cruza. Una vez sacrificados, se disecó macro y mesoscópicamente la región pélvica, seleccionándose vesículas uterinas para sus estudios histológico e inmunocitoquímico. Se realizaron estudios morfométricos y de cinética celular con las técnicas de Túnel y PCNA. Se efectuó estadística descriptiva en base a promedio y desviación estándar (p< 0.001), utilizando el programa estadístico Stata 9.0. Las mediciones morfométricas obtenidas fueron de diámetro y volumen de la vesícula uterina, altura de la pared uterina y lumen glandular de regiones mesometrial y antimesometrial, para los días 7 al 10 post coito. Los análisis inmunocitoquímicos permitieron determinar: índice apoptótico de los núcleos celulares y el índice celular mitótico. Para el día 8 post coito se observaron los cambios morfométricos más significativos a nivel del lumen vesicular, altura de pared uterina de la región mesometrial, y lumen glandular. El mismo día se observaron cambios importantes en los índices celular mitótico y apoptótico. El conejo podría ser una especie usada para predecir el normal desarrollo embrionario, tras la comprensión morfológica y morfométrica de la implantación. Presenta una forma poco invasiva de implantación...

The rabbit has demonstrated to be an outstanding implanting model. As an obligated ovulating animal, its pregnancy time can be established exactly. The morphologic observation of uterus cuts of 7, 8, 9 and 10 days post mating, allowed this research to rebutid an apparent sequence morphometric events, that take place during rabbit implantation. Twenty New Zealand, white, adult, female rabbits were used in this research. (Oryctolagus cunículus), nulipara. And 4, proven, fertile, males were used for mating. These males were obtained from the Bioterio of the Faculty of Medicine at the Universidad de La Frontera, Temuco, Chile. Mating day was defined as day cero, sacrificing the females days 7, 8, 9 and 10 in each mating. Once sacrificed, the pelvic region was macro and mesoscopically dissected, and the vesicles were selected for histological and immunocitochemical study. Histological studies were performed with H.E. technique; morphometric and cellular kinetics with Tunnel and PCNA techniques. Descriptive statistics was used based on an average and standard deviation (p< 0.001). The Stata 9.0 statistical program was used. The morphometric measurements obtained were: diameters and volume of the uterine vesicle, height of the uterine wall and glandular lumen of the mesometrial and antimesometrial regions to 7-10 days post coitus. The immunocitochemical analysis identified: apoptotic Index of the cellular nucleous and cellular mitotic Índex. By day 8 post coitus were observed significant morphometric changes at the vesicular lumen, height of the uterine wall of the mesometrial region and glandular lumen. For the same day important changes of the cellular mitotic Índex and apoptotic Index were observed. The rabbit could be a species used to predict normal embryo development, after the morphologic comprehension of the implantation, given its not so invasive form of implantation and its capacity of early placenta formation. Providing updated information...

Relación útero-embrionaria y su variación morfológica durante el periodo implantacional en conejo / Uterus-embryonnic relatioship and its morphologic variation during implantational period in the rabbit

La implantación embrionaria en úteros de mamíferos es iniciada por la formación de un contacto directo célula a célula entre el trofoblasto del blastocisto y el epitelio uterino. El conejo ha demostrado ser un excelente modelo para los estudios de implantación y se presenta como uno de los mamíferos con mayor eficiencia reproductiva. Nuestro objetivo fue reconstruir la secuencia de los eventos, tanto morfológicos como morfométricos que ocurren durante la implantación en el conejo, entre los 7 a 10 días post coito. Se utilizaron 16 conejas neozelandesas blancas adultas (Oryctolagus cuniculus), mantenidas en cautiverio y obtenidas del Bioterio de la Facultad de Medicina de la Universidad de La Frontera, Temuco, Chile. Una vez sacrificadas, el útero de cada coneja gestante fue fijado en formalina al 10 por ciento y postfijado en Dubosq brasil. Se utilizaron las técnicas histológicas: H. E. y Tricrómico de Masson e histoquímicas: PAS, PAS diastasa, Azul de Alcián pH 2.5 y pH 1.0, y Picrosirius de Junqueira. Otras vesículas se fijaron en methacarn para su estudio inmunocitoquímico con el anticuerpo monoclonal (CK) AE1, con la finalidad de evidenciar cambios en los filamentos intermedios de las células epiteliales. Se consignó el diámetro de la vesícula en mm y glándulas uterinas en µm. Desde el día 7 al 10 post coito, el diámetro de la vesícula embrionaria aumentó 2 mm por día. Las glándulas uterinas experimentaron un significativo y distinto crecimiento, dependiendo si éstas se encontraban en la pared mesometrial o antimesometrial. En conejo, el sinciciotrofoblasto del hemisferio abembriónico del blastocisto, se adhiere y fusiona con el epitelio uterino, luego la cámara implantacional, en coneja, se forma como resultado de la expansión del blastocisto que mantiene contacto con varios puntos de la pared uterina, ya sea en la región antimesometrial como mesometrial. La primera adhesión, ocurre entre el sinciciotrofoblasto y las células epiteliales de la pared antimesometrial antes de que ocurra una modificación epitelial general y del tejido conjuntivo subyacente, con aumento de glicógeno y glicosaminoglicanos.